jeudi 6 octobre 2016

Fonctions cellulaires de l'ADN et l'ARN

Fonctions cellulaires de l’ADN et l’ARN


FONCTIONS CELLULAIRES DE L’ADN ET L’ARN

Ttes les cell vivantes contiennent des Ac nucléiques constt par l’ADN et l’ARN.
L’ADN est formé par 2 chaînes polynucléotidiques anti-parallèles, reliées par des ponts hydrogènes
entre les bases ; on dit que l’ADN est bicaténaire.
L’ARN est un polymère monocaténaire

Ces Ac nucléiques ont une double fn :
assurer la transmission des caract génétiques lors de la div cell (réplication) et
assurer la synthèse des protéines conformément au code génétique contenu dans l’ADN (transcription)


Colorations spécifiques
Méthodes auto-histo-radiologiques
Analyse chimique après ultra-centrifugation différentielle
Immunofluorescence
Expériences de transformation bact
Transduction bactériophagique
Conjugaison des bact


Pratiquement exclusivement nucléaire
Elle est constt par l’enchainement linéaire de nucléotides.
Chaq nucléotide comprend                      Désoxyribose
                                                                  Ac phosphorique
                                                                  Base azotée                Purique (adénine ou guanine)
                                                                                                                 Pyrimidique (thymine ou cytosine)                                                                                       
2 filaments de poly-nucléotides sont enroulés l’un sur l’autre en une double hélice. Chaque hélice est formée par les nucléotides ; les 2 hélices sont réunis par des liaisons hydrogènes qui se forment entre les bases azotées de complémentarité bien définie (A=T ; C=G).
Dans le noyau, l’ADN est ass à des histones. La double hélice subit 2 enroulements donnant successivement fibrille et fibrine.

Princ cytoplasm
L’ARN est constt par l’assemblage de multiples nucléotides dont le pentose est le ribose et où la thymine est remplacée par l’uracile complémentaire de l’adénine (U=A)
ARNt : 30 - 40% ARN total
ARNm : 1% de l’ARN total (transport de l’info génétique de l’ADN)
ARNr : 60 - 70% de l’ARN total : il est formé de 2 sous-unités (une de 40S et une de 60s)


L’ADN contient l’info génétique et il permet la biosynthèse des proteines.
Il comprend plusieurs régions :
Gènes de struct codant les protéines
RégionS codant les ARNr et ARNt
Région permettant la régulation de la synthèse protéique
·         Il s’exprime par la spécificité de la struct primaire des protéines.
·         Mécan de transport de l’info génétique
Le code génétique est constt par l’enchainement des nucléotides, dc d’AA
L’existence de 4 nucléotides diff permet la constt de 64 triplets diff.
Comme il existe 20 AA plusieurs triplets codent le même AA : le code est dit dégénéré, universel.
Par contre aucun triplet ne code plusieurs AA à la fois : le code n’est pas ambigu.
La lecture s’effectue sans ponctuation, ni chevauchement dans le sens 5’-3’.
La délétion ou l’insertion  d’un nucléotide se traduit par un non-sens et d’arrêt de la synthèse prot
                                          De 3 nucléotides rend illisible la partie du message touchée
a.      Au cours de la mitose
·         Durant la phase S : la réplication est semi conservatrice, chaq brin d’ADN servant de modèle pr l’édification de l’hélice cplt. Cette réplication commence aux points d’initiation ss l’influence des déroulases ; l’ADN polymérase assure la synthèse.
·         Au cours de la phase G2 : la cellule est tétraploïde.
·         La phase M ou mitose : le stock d’ADN doublé est réparti entre les 2 cell filles assurant la transmission du code génétique
b.      Au cours de la méiose
L’absence de synthèse d’ADN entre la 1ière et la 2nde division de la méiose explique que chaque gamète ne contient que N chromo. Ce qui permet la fécondation avec formation d’une cell à 2N chromo dont la teneur en ADN reste cste, d’une génération à l’autre.
Elle n’est pas bien connue.
La réplication est bloquée par diverses subst (Actinomycine, 5FU)

Rôle fondamental, car les protéines sont l’expression de l’info contenue dans le génotype.
a.      Transcription
Cette étape a lieu dans le noyau de la cellule.
La transcription se fait ds le sens 5’-3’ à partir d’un site promoteur.
L’ARNm est synthétisé sur le brin matrice d’ADN grâce à l’ARN polymérase et se fait en 3 étapes :
déroulement de la double hélice
ass des brins cplt d’ARNm sur l’ADN
migration de l’ARNm dans le cytoplasme
b.      Traduction
Cette étape à lieu dans le cytoplasme ; l’info apportée par l’ARNm sera décodée
·         Fixation de l’ARNm sur la ss-unité 40S du riboS, les ARNr st synth au niv du nucléole
·         Les AA sont préalablement activés par un cplx enzyme-AMP-Aminoacyl ;
Fixation des AA sur l’extrémité CCA de l’ARNt spécifique grâce à l’aminoacyl-t-RNA synthétase ; il existe plusieurs ARNt pr 1 seul AA
·         Initiation : la ss-unité 60 S du riboS offre 2 sites de fixation (F et A) pr les ARNt. Les ARNt se fixent par leurs anti-codons aux codons de l’ARNm selon la loi de la complémentarité.
Cette étape nécessite                        fact d’initiation,
GTP et
Mg++
·         Elongation : lecture de l’ARNm dans le sens 5’-3’ codon par codon, l’extrémité N-terminale étant mise en place la 1ière
La croissance de la chaîne protéique nécessite       du guanosine-triphosphate
                                                                                   2 fact protéiques (T et G) et
                                                                                  Du Mg++
·         Terminaison est signalée par un codon stop (UAA, UAG ou UGA). Le riboS se scinde en ses 2 ss-unités et l’ARNm est détruit.
Elle nécessite 3 fact de libération protéique


Ttes les cell de l’organisme possèdent le même génome mais, selon leur différentiation, elles synthétisent des protéines diff bien que la struct de l’ADN soit invariable.
·         Chez les procaryotes, il existe une régulation par induction et une régulation par répression : c’est le modèle de MONOD et JACOB
·         Chez les eucaryotes le gène détecteur est sensible à un signal moléculaire (cplx horm-récepteur)


PCR 
RT-PCR : Reverse Transcription-PCR
Analyse SOUTHERN consiste à identifier une séquence d’ADN génomique à l’aide d’une séquence d’ADN cplt
Analyse NORTHERN : analyse par transfert d’ADN et hybridation
Analyse WESTERN : Analyse des protéines et marquages par anti-corps

Une mutation est une modification de l'info génétique dans le génome d'une cell ou d'un virus. C'est donc une modification de la séquence de l'ADN, ou bien dans l'ARN pour un virus à ARN.
·         Mutations faux-sens : cette mutation ponctuelle se traduit par le remplacement d'un nucléotide par un autre
·         Mutations non-sens : le changement d'un nucléotide provoque le remplacement d'un codon spécifiant un AA par un codon-stop
·         Mutations silencieuses : ce sont des mutations qui ne modifient pas la séquence d'une protéine, à cause de la redondance du code génétique (le nouveau triplet code le même AA que le triplet original), ou parce qu'elle touche une région non codante de l'ADN, ou un intron


Le mécan de codage de l’info génétique et de la synthèse protéiques est universel. Les processus se synthèse des protéines jouent également un rôle important dans l’infect virale, la cancérisation et l’immunité.

                                               







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